طراحی تست الایزای رقابتی به منظور ردیابی آنتی بادی های ضد ویروس اسهال ویروسی گاوان

پایان نامه
چکیده

بیماری اسهال ویروسی گاوان و بیماری مخاطی سندرومهایی با نشانههای کلینیکی متفاوت هستند که توسط ویروسی مشابه از جنس پستی ویروس و از خانواده فلاوی ویریده ایجاد می گردند. در تشخیص اولیه وضعیت آلودگی در گله های گاو غالباً بشکل روزمره از آزمایش سرولوژیک الایزا استفاده می شود. آزمایش الایزا ممکن است بصورت غیر مستقیم و یا رقابتی انجام گردد اما بدلیل احتمال وجود واکنش های غیراختصاصی الایزای رقابتی که در آن از آنتی بادی منوکلونال استفاده می گردد ارجحیت دارد. هدف از این مطالعه طراحی تست الایزای رقابتی برای تعیین آنتی بادی های ضد ویروس اسهال ویروسی گاو با استفاده از قطعه ی چهارم پروتئین نوترکیب ns3 و یک آنتی بادی منوکلونال ضد پروتئین ns3 و سپس محاسبه ی حساسیت و ویژگی نسبی آن، در مقایسه با تست خنثی سازی ویروس به عنوان استاندارد طلایی بود. در این تحقیق ابتدا بر اساس یک آزمایش اولیه منوکلونال آنتی بادی مناسب از میان چندین آنتی بادی دردسترس انتخاب گردید. سپس رقت های مناسب آنتی ژن و آنتی بادی منوکلونال و نیز رقت مناسب کنژوگه با استفاده از روش تیتراسیون چکربورد در قالب یک الایزای غیرمستقیم تعیین گردیدند. پس از آزمایش 197 عدد نمونه ی سرمی گاو با الایزای رقابتی استاندارد شده و انجام آنالیز roc در مقایسه با نتایج بدست آمده از تست خنثی سازی ویروس، نقطه ی برش الایزای رقابتی طراحی شده برابر با 88/41 تعیین گردید. با مشخص شدن نقطه برش و نتایج بدست آمده از آزمایش سرم ها، حساسیت و ویژگی الایزای رقابتی در مقایسه با خنثی سازی ویروس بترتیب 93.90% و ویژگی 100% محاسبه گردید. با استفاده از آزمون مک نمار نشان داده شد که تفاوت معنی داری بین روش vn و نتایج الایزای رقابتی وجود ندارد. همچنین برا ساس نتایج بدست آمده مشخص شد که آزمایش طراحی شده نسبت به کیت الایزای تجاری (با حساسیت 81% و ویژگی 92%) دارای کیفیت و کارایی بالاتری می باشد. بنابر این برمبنای نتایج این تحقیق، تست الایزای رقابتی طراحی شده با پروتئین نوترکیب ns3 برای تعیین آنتی بادی های ضد ویروس اسهال ویروسی گاو بسیار مفید می باشد.

منابع مشابه

تولید آنتی بادی مونوکلونال بر ضد گلیکوپروتئین erns و پروتئین ns3 نوترکیب ویروس اسهال ویروسی گاوان (سویه nadl)

اسهال ویروسی گاوان (bvd) با یک انتشار جهانی، یکی از بیماری های مهم اقتصادی در گاو می باشد. ویروس اسهال ویروسی گاوان (bvdv) متعلق به خانواده فلاوی ویریده و جنس پستی ویروس، یکی از مهمترین پاتوژن های ویروسی گاو است که باعث بروز سندرم های بالینی مختلفی می شود. دام های مبتلا به شکل عفونت پایدار با ویروس اسهال ویروسی گاوان، به عنوان منبع اصلی حفظ و انتشار ویروس بین گله ها محسوب می شوند، بنابراین تعیی...

بررسی شیوع بیماری اسهال ویروسی گاوان به روش الایزای غیر مستقیم در گاوهای شیری هلشتاین منطقه تبریز

بیماری اسهال ویروس گاو باعث تضعیف سیستم ایمنی دام می­شود و حیوان را مستعد ابتلا به سایر بیماری­ها می­نماید. نظر به اینکه عادی­ترین شکل این بیماری فرم مزمن آن است، در کشور ما به­صورت جدی مورد توجه قرار نمی­گیرد. با توجه به اینکه در گله­های شیری خیلی از موارد ناباروری  بدون مشخص شدن علت آن وجود دارد و هیچ­گونه واکسیناسیون و کنترل علیه بیماری اسهال ویروسی گاو در گاوداری­های صنعتی تبریز صورت نمی­گی...

متن کامل

ارزیابی اثربخشی واکسن‌های غیرفعال علیه اسهال ویروسی گاوان

زمـیـنــه مــطــالـعــه: دو بـیـمــاری اسـهــال ویــروســی گـاوان ‌(Bovine viral diarrhea, BVD) و رینـوتـراکئیـت عفـونـی گـاوان (Infectious bovine rhinotracheitis, IBR)، از جمله عوامل تحمیل خسارات اقتصادی قابل توجه در صنعت دامپروری ایران می‌باشد. هدف: ‌با توجه به فقدان واکسن تولید داخل، ضروری است، اثربخشی واکسن‌های تجاری وارداتی بررسی شود. روش کار: کارآزمایی شاهددار تصادفی شده و کور با هدف تعیی...

متن کامل

بررسی شیوع سرمی آنتی بادی های علیه ویروس های آکابان و زبان آبی با استفاده از الایزای رقابتی در گاوهای شیری دامپروری های صنعتی اطراف سمنان

    در مطالعه‌ی حاضر یک بررسی مقطعی جهت تعیین شیوع سرمی ویروس­های آکابان و زبان‌آبی در گله­های گاو شیری سمنان (ایران) انجام پذیرفت.  تعداد 184 نمونه سرم از گاوهای شیری منطقه­ی جمع‌آوری شد و آنتی­بادی­های ضد این دو ویروس با استفاده از روش الایزای رقابتی در نمونه­های اخذ شده ردیابی شدند.  میزان شیوع سرمی ویروس­های آکابان و زبان‌آبی در گاوها به ترتیب 23 درصد (75-0 درصد ب...

متن کامل

مقایسه سه روش ایمونو‌ ‌فلور سنت، بیوپسی گوش (Ear Notch Test)‌، رد یابی آنتی ژن توسط الایزای تسخیری (antigen capture ELISA)‌ و‌ RT-PCR جهت تشخیص موارد مشکوک به عفونت حاد پستی ویروسی در گوساله ها

دوازده راس گوساله سنین 4 تا 10 ماهگی دارای نشانه‌های بالینی مشکوک به عفونت با ویروس اسهال ویروسی گاوان شناسایی شدند. از بیوپسی گوش این گوساله‌ها پس از تثبیت در فرمالین، بلوک‌های پارافینه و مقاطع بافتی تهیه شده و روی لام‌های آغشته به پلی– ال– لیزین ‌ (poly-L-lysine)‌چسبانیده و توسط کیت تجاری آنتی‌بادی مونوکلنال ضد ویروس اسهال ویروس گاوان، نشاندار شده توسط فلورسین ایزوتیوسیانات رنگ آمیزی‌ ‌ایم...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید چمران اهواز - دانشکده دامپزشکی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023